细胞培养基

一、什么是细胞培养基

细胞培养基是培养细胞的培养基，既是供给细胞营养和促使细胞生殖增殖的基础物质，也是培养细胞生长和繁殖的生存环境，一般是盐、碳水化合物、维生素、氨基酸、代谢前体、生长因子、激素和微量元素的复杂混合物。

二、常用的细胞培养基有哪些

细胞培养基的种类众多，由于不同细胞系对这些成分的要求各不相同，因此产生了不同类型的培养基，常用的细胞培养基主要有：

1、MEM培养基

是一种添加了营养物的最低必需培养基，仅含有12种必需氨基酸、L-谷氨酰胺和8种维生素，含糖量为1g/L。MEM是一种最基础、最常用的细胞培养基，主要应用于贴壁细胞的培养，在添加血清后，可用于培养多种单层生长的细胞，如成纤维细胞。修改配方后的a-MEM则可广泛应用于各种哺乳动物悬浮和贴壁细胞培养。

2、DMEM培养基

氨基酸含量是MEM的两倍，维生素含量是MEM的4倍，以及硝酸铁、丙酮酸钠和一些补充氨基酸。此外，DMEM分为低糖型和高糖型，葡萄糖含量分别为1g/L和4.5g/L。（低糖适于依赖性贴壁细胞培养，特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养；高糖更适合高密度悬浮细胞培养，也适用于附着性较差，但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养，也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。）

3、IMDM培养基

用于淋巴细胞和杂交瘤细胞的生长。与DMEM相比，添加了HEPES和硒，硝酸钾取代了硝酸铁，并且含有更多的氨基酸、维生素和无机盐。

4、Ham 's F-12K培养基

用于支持原代细胞的生长和分化。F-12K增加了氨基酸、丙酮酸、生物素、钙、镁、腐胺和酚红的含量。

5、DMEM/F12培养基

DMEM和F12的1:1混合物，能够在低血清条件下支持多种哺乳动物细胞的培养，在此培养基中成功培养的细胞包括：MDCK、神经胶质细胞、成纤维细胞和人内皮细胞等。

6、McCoy’s 5A培养基

广泛用于多种原代细胞及细胞系的培养，如来源于骨髓、皮肤、脾脏、肾脏和肺等组织的哺乳动物原代细胞。

7、RPMI-1640培养基

是在McCoy’5A的基础上进行改良研发出的，最初用于人白血病细胞的悬浮培养，后来发现也适用于HeLa、MCF-7、PC12、外周血单核细胞（B/T淋巴细胞）和星形细胞的培养。RPMI 1640与其它培养基的区别是含有还原型谷胱甘肽和高浓度维生素。此外还含有含有MEM、DMEM中不含的生物素、维生素B12和对氨基苯。

8、L15培养基

L-15培养基的配方中不含用于CO2平衡环境的碳酸盐缓冲系统, 而是用磷酸盐、L-精氨酸、L-组氨酸和 L-半胱氨酸作为缓冲剂。用半乳糖和丙酮酸钠代替葡萄糖以防止乳酸的形成。可以在无CO2培养箱中进行细胞培养，或者拧紧瓶盖培养。

三、细胞培养基的品质要求

细胞培养基有多种，不同种类的细胞培养基用于培养不同细胞，一般来说，好的细胞培养基，需要满足以下几点要求：

1、外观

颜色、粉末细度须均匀。

2、溶解性

培养基完全溶解，可以避免培养基内营养成分的流失。

3、pH值

哺乳类动物细胞生长需要合适的酸碱度，同时pH值的测定也可以检查培养基的批间差异。

4、水分

培养基的营养成份很丰富，利于微生物的滋长，因此水分的含量控制可以延长有效期。

5、冰点渗透压

细胞必须生活在合适的渗透压环境中，同时渗透压值的测定也可以检查培养基的批间差异。

6、菌落总数

粉末培养基不是无菌制剂，培养基本身的营养成分很丰富，容易滋生微生物，因此菌落的控制可以延长有效期

7、细胞生长试验

可检查细胞培养基是否有促生长的能力，以及是否有不利细胞生长的毒素。

8、细菌内毒素

为满足生物制品细菌内毒素的控制要求，作为生物制品生产原料的培养基同样需要细菌内毒素控制。

9、稳定性

确定产品的储存、运输条件，产品的保质期限。

10、一致性

验证产品的均一性。