酶标仪
【酶标仪】酶标仪的用途酶标仪是测什么的酶标仪的工作原理
酶标仪的用途
1、血源四项:
卫生部临床输血技术规范要求,为确保每位受血者安全,预防和杜绝因输血后感染乙型肝炎(乙肝)、丙型肝炎(丙肝)、梅毒、艾滋病引起的医疗纠纷,要求受血者在输注血液制品前均接受传染病四项检测。
2、病毒、病菌感染疾病:
(1)人类免疫缺陷病毒抗体(HIVⅠ/Ⅱ型)检测;
(2)乙肝病毒HBV(两对半)检测;
(3)甲、丙、丁、戊、庚肝等病毒感染检测;
(4)梅毒螺旋体(TP)抗体;
(5)乙型脑炎病毒抗体检测;
(6)肺炎衣原体抗体;
(7)肺炎支原体抗体;
(8)麻疹病毒抗体;
(9)EB病毒;
(10)结核杆菌抗体等检测。
3、优生优育产前检查:
主要项目有:风疹(RV)感染;巨细胞(CMV)感染;单纯疱疹(HSV I、II型)感染和弓形体感染。TORCH综合症患者造成孕妇流产、死胎,出生后有严重的智力障碍,生活不能自理,给家庭及社会造成极大的精神及经济负担。我国每年约有26000个TORCH患儿出生,平均每小时就有3人,对优生优育与人口素质构成极大的威胁,因此它的感染诊治工作引起普遍关注。
4、唐氏儿(先天愚型)风险筛查:
用酶标仪进行以下项目检测,再利用唐氏儿风险分析软件,可以在产前对产生唐氏儿的风险做出判定,常检测以下几项:
(1)甲胎蛋白测定(AFP);
(2)游离β绒毛膜促性腺激素(Free β-hCG)测定;
(3)妊娠相关血浆蛋白(PAPP-A);
(4)游离雌三醇
5、甲状腺(五项)检验:
(1)三碘甲腺原氨酸T3含量测定;
(2)甲状腺素T4含量测定;
(3)促甲状腺素TSH定量测定;
(4)抗甲状腺球蛋白抗体TG-Ab检测;
(5)抗甲状腺微粒体抗体TM-Ab检;
6、性激素(六项)检验;
(1)雌二醇EST(E2);
(2)睾酮TES;
(3)孕酮Pr;
(4)卵泡刺激素FSH;
(5)催乳素PRL;
(6)黄体生成素LH;
7、肿瘤标志物检测:
(1)甲胎蛋白AFP测定;
(2)癌胚抗原CEA测定;
(3)乳腺癌抗原CA15-3;
(4)胰腺癌抗原CA242;
(5)胃肠癌抗原CA19-9;
(6)卵巢癌;
(7)抗原CA125;
(8)前列腺特异抗原测定PSA;
(9)β2微球蛋白测定β2-MG;
(10)人绒毛膜促性腺激素-β测定β-HCG。
酶标仪:即酶联免疫检测仪(ELISA Reader)是酶联免疫吸附试验的专用仪器。可简单地分为半自动和全自动2大类,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一个比色计,即用比色法来分析抗原或抗体的含量。ELISA测定一般要求测试液的最终体积在250ul以下,用一般光电比色计无法完成测试,因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。
酶联免疫吸附试验方法
酶标朕免疫吸附试验方法简称酶标法,是标记技术中的一种,是从荧光抗体技术,同位素免疫技术发展而来的一种敏感,特异,快速并且能自动化的现代技术。
酶标法的基本原理是将抗原或抗体与酶用胶联剂结合为酶标抗原或抗体,此酶标抗原或抗体可与固相载体上或组织内相应抗原或抗体发生特异反应,并牢固地结合形成仍保持活性的免疫复合物。当加入相应底物时,底物被酶催化而呈现出相应反应颜色。颜色深浅与相应抗原或抗体含量成正比。
由于此技术是建立在抗原-抗体反应和酶的高效催化作用的基础上,因此,具有高度的灵敏性和特异性,是一种极富生命力的免疫学试验技术。
酶标仪的工作原理
酶标仪实际上就是一台变相的专用光电比色计或分光光度计,其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同。
光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光,进入塑料微孔极中的待测标本。该单色光一部分被标本吸收,另一部分则透过标本照射到光电检测器上,光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号。电信号经前置放大,对数放大,模数转换等信号处理后送入微处理器进行数据处理和计算,最后由显示器和打印机显示结果。
微处理机还通过控制电路控制机械驱动机构X方向和Y方向的运动来移动微孔板,从而实现自动进样检测过程。而另一些酶标仪则是采用手工移动微孔板进行检测,因此省去了X,Y方向的机械驱动机构和控制电路,从而使仪器更小巧,结构也更简单。
微孔板是一种经事先包理专用于放置待测样本的透明塑料板,板上有多排大小均匀一致的小孔,孔内都包埋着相应的抗原或抗体,微孔板上每个小孔可盛放零点几毫升的溶液。其常见规格有40孔板,55孔板,96孔板等多种,不同的仪器选用不同规格的孔板,对其可进行一孔一孔地检测或一排一排地检测。
酶标仪所用的单色光既可通过相干滤光片来获得,也可用分光光度计相同的单色器来得到。在使用滤光片作滤波装置时与普通比色计一样,滤光片即可放在微孔板的前面,也可放在微孔板的后面,其效果是相同的。光源灯发出的光经聚光镜,光栏后到达反射镜,经反射镜作90o反射后垂直通过比色溶液,然后再经滤光片送到光电管。
酶标仪和普通的光电比色计有以下几点差异:
(1)盛装待测比色液的容器不再使用比色皿,而是使用塑料微孔板。微孔板常用透明的聚乙烯材料制成,对抗原抗体有较强的吸附作用,故用它作为固相载体。
(2)由于盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能垂直穿过,因此酶标仪的光来都是垂直通过待测溶液和微孔板的,光束既可是从上到下,也可以是从下到上穿过比色液。
(3)酶标仪通常不仅用A,有时也使用光密度OD来表示吸光度。
酶标仪可分为单通道和多通道2种类型,单通道又有自动和手动2种之分。自动型的仪器有X,Y方向的机械驱动机构,可将微孔板L的小孔一个个依次送入光束下面测试,手动型则靠手工移动微孔板来进行测量。
在单通道酶标仪的基础上又发展了多通道酶标仅,此类酶标仅一般都是自动化型的。它设有多个光束和多个光电检测器,如12个通道的仪器设有12条光束或12个光,12个检测器和12个放大器,在X方向的机械驱动装置的作用下,样品12个为一排被检测。多通道酶标仪的检测速度快,但其结构较复杂价格也较高。
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